Анализ белка и общего азота.

Анализ по методу Кьельдаля, безусловно, самый распространенный способ определения азота (белка) для разнообразных приложений. Задача аналитического определения содержания белка имеет долгую историю. Йохан Кьельдалю впервые представил свой метод в 1883 г на заседании Датской химического общества, когда он, являясь руководителем лаборатории Карлсберг, занимался изучением процессов, связанных с производством пива. При изучении белков в процессе производства солода, он разработал анализатор азота, работающий по методике более быстрой и точной, чем существующие на тот момент.

Анализатор белка по методу Кьельдаля является универсальным, так как он позволяет работать с очень широким спектром проб:

• продукты питания (зерно, мясо, рыба, молоко, молочные продукты, фрукты, овощи);
• напитки;
• контроль состояние окружающей среды (сельское хозяйство, семена масличных культур, почвы, удобрений, водного , сточные воды, шлам);
• анализы для химической и фармацевтической промышленности (бумага, текстиль, резина, пластик, полимеры).

Общий азот по Кьельдалю (TKN) представляет из себя сумму содержаний в пробе органического азота, аммиака (NH3) и аммония (NH4 +) и применяется для проведения анализов почвы, воды и сточных вод. Для расчета общего азота (TN), к значению TKN прибавляют концентрации нитритного и нитратного.

В настоящее время анализаторы азота по методу Кьельдаля используютеся для контроля качества многих продуктов. Его определение часто используется вместо определения содержания белка в продуктах питания. Его содержание определяют пересчетом. Коэффициенты пересчета TKN в концентрацию белка, известные как N-фактор, зависят от его типа, присутствующего в образце, и о того, какая его часть состоит из азотсодержащих аминокислот. Однако, эти коэффициенты находятся в весьма узком диапазоне. Например, значения N-факторов, для пищевых продуктов могут изменяться от 6,38 для молочных и 6,25 для мяса, яиц и кукурузы (кукуруза) до 5,70 для пшеничной муки, 5,46 и для арахиса.

Этот метод требует большого количества времени для проведения анализа, но позволяет добиться высокой надежности и точности результатов, если выполняется правильно. Успешность его проведения зачастую определяется правильностью подготовки образца.

Анализ по методу Кьельдаля могут быть разбит на три основных этапа:
1. Разложение пробы с использованием концентрированного раствора кислоты. Это достигается путем кипячения однородного образца в концентрированной серной кислоте с образованием раствора сульфата аммония.
2. Перегонка с паром. При добавлении к обрабатываемой смеси избытка щелочи происходит превращение сульфата аммония в газообразный аммиак. Смесь кипятят и перегоняют с паром с последующей конденсацией и улавливанием амиака в принимающем растворе борной кислоты.
3. Титрование - для определения количества аммиака в принимающем растворе. Содержание азота в пробе определяют умножением полученной концентрации аммиака на коэффициент пересчета (N-фактор).

В настоящее время метод Кьельдаля утвержден в качестве арбитражного такими научными ассоциациями ,как AOAC International, AACC, AOCS, EPA, ISO, и другими. Все анализаторы белка по методу Кьельдаля от компании VELP Scientifica полностью соответствует рекомендациям вышеупомянутых организаций.